Oxálsavtartalom meghatározása gyümölcsökben és zöldségekben nagy teljesítményű folyadékkromatográfiával (HPLC)
1. Kísérleti alapelv és módszertervezés
A gyümölcsökben és zöldségekben gyakori szerves savként az oxálsav tartalma közvetlenül befolyásolja az élelmiszerek ízét és tápértékét. Ez a kísérlet fordított fázisú nagy teljesítményű folyadékkromatográfiát (RP-HPLC) alkalmaz. Savas mozgófázisú körülmények között az oxálsavat C18 kromatográfiás oszlop segítségével választják el az interferáló anyagoktól az alapvonalnál. A kvantitatív elemzéshez 210 nm-re beállított ultraibolya detektort használnak, amely az oxálsavmolekulák karboxilcsoportjainak UV-abszorpciós jellemzőin alapul.
2. Standard görbe és minta-előkészítés
A standard oldatok elkészítéséhez gradiens hígítási módszert alkalmazunk: pontosan mérjünk ki 25,0 mg oxálsav-dihidrátot, és hígítsuk 25 ml-re ultratiszta vízzel, hogy 1 mg/ml koncentrációjú törzsoldatot kapjunk. Ezt egymást követően hígítjuk 50, 100, 200, 400 és 800 µg/ml koncentrációjú standard oldatok sorozatává, minden koncentrációt háromszor injektálva.
A minta előkészítéséhez mikrohullámú extrakciót alkalmazunk: mérjünk ki 5,00 g gyümölcs-/zöldséghomogenizátumot, adjunk hozzá 10 ml 0,1 mol/L sósavoldatot, kezeljük 60°C-on mikrohullámú sütővel 10 percig, szűrjük át egy 0,45 µm-es membránszűrőn, és gyűjtsük össze a szűrletet vizsgálathoz.
3. Kromatográfiás körülmények optimalizálása
A mozgófázis egy 0,01 mol/l kálium-dihidrogén-foszfát puffer (pH 2,5) – acetonitril (95:5) rendszer, 0,8 ml/perc áramlási sebességgel és 35 °C oszlophőmérséklettel. Az acetonitril arányának beállítása azt mutatja, hogy amikor a szerves fázis meghaladja a 10%-ot, az oxálsav retenciós ideje kevesebb mint 3 percre rövidül, de csúcsosodás figyelhető meg. A végső optimalizált körülmények között az oxálsav retenciós ideje 4,2 perc, ami teljes elválasztást eredményez a szomszédos citromsavtól és almasavtól (felbontás > 1,5).
4. Módszervalidáció
A lineáris tartomány ellenőrzése jó lineáris összefüggést mutat a csúcsterület és a koncentráció között a 10–1000 µg/ml tartományban (R² = 0,9993). A jel-zaj viszonyok módszerével meghatározott kimutatási határ (LOD) 0,5 µg/ml. Az ismételhetőségi vizsgálatokban ugyanazon spenótminta hat ismétlődő meghatározásának RSD-je 1,8%. A három szinten (80%, 100% és 120%) végzett tüske-visszanyerési kísérletek átlagosan 98,2%, 102,4% és 97,8%-os visszanyerést eredményeznek, ami megfelel a kvantitatív elemzés követelményeinek.
5. Valós minták elemzése
Hat kereskedelmi forgalomban kapható gyümölcsöt és zöldséget teszteltek: spenótot (356 ± 12 mg/100 g), zellert (215 ± 9 mg/100 g), paradicsomot (18 ± 2 mg/100 g), almát (6 ± 1 mg/100 g), banánt (nem kimutatható) és brokkolit (89 ± 5 mg/100 g). A nemzeti standard módszerrel (GB 5009.277-2016) való összehasonlítás azt mutatja, hogy a két módszer közötti relatív eltérés kevesebb, mint 5%, ami igazolja a módszer megbízhatóságát. A HPLC módszer különösen érzékenyebbnek mutatkozik, mint a hagyományos titrálási módszerek az alacsony rosttartalmú minták elemzésekor.
6. Főbb megjegyzések
A minta előkezelése során szigorúan ellenőrizni kell a pH-értéket. Ha a kivonat pH-ja meghaladja a 3-at, a kalcium-oxalát kicsapódása alacsony vizsgálati eredményekhez vezet. A mozgó fázist naponta frissen kell elkészíteni a só kicsapódásának és az oszlop eltömődésének elkerülése érdekében. Minden 20 injekció után öblítse át az oszlopot acetonitril-víz (30:70) eleggyel 30 percig, hogy megakadályozza az oszlop hatékonyságának romlását. Pigmenttartalmú minták (pl. lila káposzta) esetén ajánlott szilárd fázisú extrakciós tisztítási lépést hozzáadni az injekció beadása előtt.
7. Alkalmazási és bővítési utasítások
Ez a módszer kiterjeszthető az oxálsav kimutatására biológiai mintákban, például vizeletben és vérben. A mozgófázis összetételének beállításával (pl. tetrabutilammónium-hidroxid hozzáadásával) az oxálsav és metabolitjai egyidejűleg meghatározhatók. Tömegspektrometriás detektorral kombinálva pontosabb nyomokban történő kimutatási módszer alakítható ki. Az élelmiszeriparban ez a módszer fontos adattámogatást nyújthat az alacsony oxálsavtartalmú fajták kiválasztásához és a főzési folyamatok optimalizálásához.
Zibo Anhao Chemical Co., Ltd. – Oxálsav
A Zibo Anhao Chemical Co., Ltd. megbízható beszállítója és exportőre a kiváló minőségű oxálsavnak (ipari minőségű, legalább 99,6%) Shandongból, Kínából. Oxálsavunk fehér kristályos szilárd anyag, más néven etándisav, molekulaképlete C₂H₂O₄. Nagy tisztaságú, alacsony szennyeződéstartalmú és stabil minőségű a különböző gyártási tételek között, így megfelel a textil-, bőr-, kohászati, ritkaföldfém-feldolgozó, kémiai tisztítási és építőipari ágazatok igényeinek.
Vízmentes és dihidrát oxálsavat is kínálunk, 25 kg-os, 50 kg-os és 1000 kg-os ömlesztett zsákokban. Szigorú minőségellenőrzési eljárásainkkal, teljes körű vizsgálati jelentéseinkkel és rugalmas ellátási terveinkkel stabil szállítást és következetes teljesítményt biztosítunk a globális vásárlók számára. Termékeinket széles körben exportálták Délkelet-Ázsiába, Európába, Afrikába és Amerikába, ahol elismertségre tettünk szert megbízható minőségük és versenyképes áraik miatt.
Válassza a Zibo Anhao Chemical megbízható oxálsavellátását és professzionális, egyablakos vegyipari szolgáltatását.
Válassza a Zibo Anhao Chemical-t, ha nagy tisztaságú oxálsavat keres, amely stabil teljesítményt és értéket biztosít vállalkozása számára. Nagyobb megrendelésekért vagy műszaki adatokért vegye fel velünk a kapcsolatot: info@anhaochemical.com
